Для цитирования:
Багавова А. Р., Величко Н. С., Пылаев Т. Е., Федоненко Ю. П. Получение флуоресцентно меченного эндофитного штамма бактерий Herbaspirillum lusitanum P6-12 для их детекции in vivo и in vitro // Известия Саратовского университета. Новая серия. Серия: Химия. Биология. Экология. 2021. Т. 21, вып. 3. С. 286-291. DOI: 10.18500/1816-9775-2021-21-3-286-291
Получение флуоресцентно меченного эндофитного штамма бактерий Herbaspirillum lusitanum P6-12 для их детекции in vivo и in vitro
Методом электропорации получен штамм Herbaspirillum lusitanum P6-12, содержащий векторную плазмиду pJN105TurboGFP, которая кодирует синтез зеленого флуоресцирующего белка GFP, и имеющий устойчивость к антибиотику гентамицину. Сконструированный штамм H. lusitanum P6-12 по своим культурально-морфологическим и биохимическим свойствам не отличался от исходного типового природного штамма H. lusitanum P6-12. На плотных питательных средах рекомбинантный штамм формировал колонии желто-зеленого цвета, флуоресцирующие при УФ-облучении. При инокуляции полученной культурой растительных объектов наблюдали зеленое свечение маркированных клеток H. lusitanum P6-12, активно колонизирующих внутренние ткани растения-хозяина. Созданный штамм можно использовать в качестве модельного для изучения закономерностей и особенностей поведения организмов в интегрированных системах, в том числе для отслеживания бактериальных клеток в ходе взаимодействия с растениями, оценки их выживаемости, конкурентоспособности и т.д.
- Valverde A., Velazquez E., Gutierrez C., Cervantes E., Ventosa A., Igual J. M. Herbaspirillum lusitanum sp. nov., a novel nitrogen-fi xing bacterium associated with root nodules of Phaseolus vulgaris // Intern. J. Syst. Evol. Microbiol. 2003. Vol. 53, № 6. P. 1979–1983. https://doi.org/10.1099 /ijs.0.02677-0
- Weiss V. A., Faoro H., Tadra-Sfeir M. Z., Raittz R. T., Souza E. M. de, Monteiro R. A., Cardoso R. L., Wassem R., Chubatsu L. S., Huergo L. F., Muller-Santos M., Steffens M. B., Rigo L. U., Pedrosa F. de O., Cruz L. M. Draft genome sequence of Herbaspirillum lusitanum P6-12, an endophyte isolated from root nodules of Phaseolus vulgaris // J. Bacteriol. 2012. Vol. 194, № 15. P. 4136–4137. https://doi.org/10.1128 /JB.00657-12
- Green E. R., Mecsas J. Bacterial secretion systems : an overview // Microbiology Spectrum. 2016. Vol. 4, № 1. https://doi.org/10.1128 / microbiolspec.VMBF-0012-2015
- Смолькина О. Н., Шишонкова Н. С., Юрасов Н. А., Игнатов В. В. Капсульные и экстраклеточные полисахариды диазотрофных ризобактерий Herbaspirillum seropedicae Z78 // Микробиология. 2012. Т. 80, № 3. С. 345–352.
- Schmidt M. A., Souza E. M., Baura V., Wassem R., Yates M. G., Pedrosa F. O., Monteiro R. A. Evidence for the endophytic colonization of Phaseolus vulgaris (common bean) roots by the diazotroph Herbaspirillum seropedicae // Braz. J. Med. Biol. Res. 2011. Vol. 44, № 3. P. 182–185. https://doi.org/10.1590/s0100-879x2011007500004
- Лавренчук Л. С., Ермошин А. А. Микробиология : практикум. Екатеринбург : Изд-во Урал. ун-та, 2019. 107 с.
- Monteiro R. A., Balsanelli E., Wassem R., Marin A., Brusamarello-Santos L. C. C., Schmidt A., TadraSfeir M. Z., Pankievicz V., Cruz L. M., Chubatsu L. S., Pedrosa F. O., Souza E. M. Herbaspirillum-plant interactions : microscopical, histological and molecular aspects // Plant Soil. 2012. Vol. 356. P. 175–196. https://doi.org/10.1007/s11104-012-1125-7