Известия Саратовского университета. Новая серия.

Серия Химия. Биология. Экология

ISSN 1816-9775 (Print)
ISSN 2541-8971 (Online)


Для цитирования:

Воробьёва С. А., Гаева А. В., Дуракова О. С., Крицкий А. А., Громова О. В., Волох О. А. Оценка экспрессии гена ctxA штамма Vibrio cholerae 569В при производстве холерной вакцины // Известия Саратовского университета. Новая серия. Серия: Химия. Биология. Экология. 2022. Т. 22, вып. 3. С. 331-336. DOI: 10.18500/1816-9775-2022-22-3-331-336

Статья опубликована на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International (CC-BY 4.0).
Полный текст в формате PDF(Ru):
(загрузок: 116)
Язык публикации: 
русский
Рубрика: 
Тип статьи: 
Научная статья
УДК: 
616.932:615.371

Оценка экспрессии гена ctxA штамма Vibrio cholerae 569В при производстве холерной вакцины

Авторы: 
Воробьёва Светлана Александровна, Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н. Г. Чернышевского
Гаева Анна Вячеславовна, ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора
Дуракова Оксана Сергеевна, ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб»
Крицкий Андрей Александрович, ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора
Громова Ольга Викторовна, ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб»
Волох Оксана Александровна, РосНИПЧИ «Микроб»
Аннотация: 

Культивирование производственных штаммов Vibrio cholerae является одним из важнейших этапов при производстве холерной бивалентной химической вакцины. При производстве иммунобиологических препаратов необходимо использование штаммов-продуцентов со стабильными свойствами, сохраняющимися в ряде генераций. Целью настоящего исследования являлась оценка экспрессии гена ctxА с помощью молекулярно-генетических методов штамма-продуцента V. cholerae 569B. Методом ПЦР с электрофоретическим учетом результатов было установлено присутствие в хромосоме данного штамма гена ctxА. Методом ПЦР с обратной транскрипцией с учетом результатов в режиме реального времени и цифровой капельной ПЦР регистрировали экспрессию данного гена во всех почасовых пробах культуральной жидкости. Иммунохимическими методами подтверждалось наличие холерного токсина в пробах, с максимальной отметкой на девятом часу, что соответствовало максимальным показателям «концентрации микробных клеток». Таким образом, молекулярно-генетическими методами показана стабильность производственного штамма V. cholerae 569В в пробах 4 независимых выращиваний.

Список источников: 
  1. Москвитина Э. А., Янович Е. Г., Куриленко М. Л., Кругликов В. Д., Титова С. В., Левченко Д. А., Водопьянов А. С., Лопатин А. А., Иванова С. М., Мишанькин Б. М., Кривенко А. С., Анисимова Г. Б., Носков А. К. Холера: мониторинг эпидемиологической обстановки в мире и России (2010–2019 гг.). Прогноз на 2020 год // Проблемы особо опасных инфекций. 2020. № 2. С. 38–47. https://doi.org/10.21055/0370-1069- 2020-2-38-47.
  2. Носков А. К., Кругликов В. Д., Москвитина Э. А., Монахова Е. В., Левченко Д. А., Янович Е. Г., Водопьянов А. С., Писанов Р. В., Непомнящая Н. Б., Ежова М. И., Подойницына О. А. Характеристика эпидемиологической ситуации по холере в мире и в Российской Федерации в 2020 г. и прогноз на 2021 год // Проблемы особо опасных инфекций. 2021. № 1. С. 43–51. https://doi.org/10.21055/0370-1069- 2021-1-43-51
  3. WHO. Weekly Epidemiological Record. 2018. Vol. 93, № 38. P. 489–500.
  4. Приказ Минздрава России от 16.12.2021 г. № 1122н «Об утверждении национального календаря профилактических прививок, календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям и порядка проведения профилактических прививок». URL: https://docs.cntd.ru/document/727605537 (дата обращения: 25.02.2022).
  5. Правила организации производства и контроля качества лекарственных средств, утв. приказом Министерства промышленности и торговли РФ от 14 июня 2013 г. № 916 (ред. от 18.12.2015). URL: https:// docs.cntd.ru/document/499029882 (дата обращения: 25.02.2022).
  6. Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. № 77 «Об утверждении Правил надлежащей производственной практики Евразийского экономического союза». URL: https:// docs.cntd.ru/document/456026099 (дата обращения: 25.02.2022).
  7. Заднова С. П. Комплексная гено- и иммунодиагностическая тест-система для идентификации холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп и оценки их вирулентности. Пат. РФ № 2404257, опубл. 20.11.2010. Бюл. № 32.
  8. Абдрашитова А. С., Яцышина С. Б., Осина Н. А., Астахова Т. С., Портенко С. А., Саяпина Л. В., Шипулин Г. А., Щербакова С. А. Разработка мультилокусных амплификационных тест-систем для выявления ускоренной идентификации эпидемически значимых штаммов холерных вибрионов // Биозащита и биобезопасность. 2014. Т. 6, № 2. С. 34–41.
  9. Плеханов Н. А., Заднова С. П., Агафонов Д. А., Смирнова Н. И. Конструирование мультиплексной ПЦР для идентификации токсигенных штаммов генетических вариантов Vibrio cholerae Эльтор и их дифференциации по эпидемическому потенциалу // Биотехнология. 2015. Т. 31, № 2. С. 82–90.
  10. Jin D., Luo Y., Zheng M., Li H., Zhang J., Stampfl M., Xu X., Ding G., Zhang Y., Tangb Y. W. Quantitative detection of Vibrio cholera toxin by real-time and dynamic cytotoxicity monitoring // Journal of Clinical Microbiology. 2013. Vol. 51, № 12. P. 3968–3974.
  11. Nasreen T., Hussain A. S., Islam M. T., Orata F. D., Kirchberger P. C., Alam M., Yanow S. K., Yann F. Simultaneous quantifi cation of Vibrio metoecus and Vibrio cholerae with its O1 serogroup and toxigenic subpopulations in environmental reservoirs // Pathogens. 2020. Vol. 9, № 12. P. 1053.
  12. Крицкий А. А., Челдышова Н. Б., Тучков И. В., Смирнова Н. И. Разработка алгоритма определения уровня экспрессии генов ctxA и toxR Vibrio cholerae методом ОТ-ПЦР с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени // Проблемы особо опасных инфекций. 2017. Т. 3. С. 53–57.
Поступила в редакцию: 
25.05.2022
Принята к публикации: 
03.06.2022
Опубликована: 
30.09.2022