Cite this article as:

Глинский С. А., Козулин С. ., Козулина Т. Н., Полтавская С. В. СЕЛЕКЦИЯ ШТАММОВ ALCALIGENES DENITRIFICANS ВКПМ В-9582 И VKM B-2243D С ПОВЫШЕННОЙ НИТРИЛАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ. Izvestiya of Saratov University. New series. Series: Chemistry. Biology. Ecology, 2012, vol. 12, iss. 2, pp. 77-?.


Heading: 
UDC: 
579.25

СЕЛЕКЦИЯ ШТАММОВ ALCALIGENES DENITRIFICANS ВКПМ В-9582 И VKM B-2243D С ПОВЫШЕННОЙ НИТРИЛАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Abstract
Выявлена и изучена диссоциация штаммов Alcaligenes denitrificans
ВКПМ В-9582 и VKM B-2243D при культивировании на
плотных питательных средах различного состава. Создана се-
лективная среда, на которой каждый из вариантов диссоциантов
формирует несколько морфологических типов колоний. Уста-
новлена корреляция между величиной нитрилазной активности
и морфологическими особенностями колоний диссоциантов.
Показано, что диссоцианты S-типа проявляют более высокую
активность нитрилазы по сравнению с диссоциантами R-типа.
Разработан экспресс-метод качественной оценки нитрилазной
активности у микроорганизмов. Изучено влияние плотности за-
сева, способа, времени культивирования, условий хранения кле-
ток на их нитрилазную активность. На основании полученных ре-
зультатов оптимизированы методы поддерживающей селекции,
хранения и подготовки клеточного посевного материала.
Выявлена и изучена диссоциация штаммов Alcaligenes denitrificans
ВКПМ В-9582 и VKM B-2243D при культивировании на
плотных питательных средах различного состава. Создана се-
лективная среда, на которой каждый из вариантов диссоциантов
формирует несколько морфологических типов колоний. Уста-
новлена корреляция между величиной нитрилазной активности
и морфологическими особенностями колоний диссоциантов.
Показано, что диссоцианты S-типа проявляют более высокую
активность нитрилазы по сравнению с диссоциантами R-типа.
Разработан экспресс-метод качественной оценки нитрилазной
активности у микроорганизмов. Изучено влияние плотности за-
сева, способа, времени культивирования, условий хранения кле-
ток на их нитрилазную активность. На основании полученных ре-
зультатов оптимизированы методы поддерживающей селекции,
хранения и подготовки клеточного посевного материала.
 

 

References
1. Безбородов А. М., Загустина Н. А., Попов В. О. Фер-
ментативные процессы в биотехнологии. М. : Наука,
2008. 335 с.
2. Пат. 2177034 RU, С 1 7 C 12 N1/20,9/78//(C 12 N 9/78,
C 12 R 1:05). Штамм бактерий Alcaligenes denitrifi cans
– продуцент нитрилазы / Полтавская С. В., Козули-
на Т. Н., Сингирцев И. Н., Козулин С. В., Воронин С. П.
3. Пат. 2337954RU, С 1 C12N 1/20 C12R 1/05. Штамм бак-
терий Alcaligenes denitrifi cans – продуцент нитрилазы /
Козулин С. В., Воронин С. П., Глинский С. А., Козули-
на Т. Н., Леонова Т. Е., Новиков А. Д., Полтавская
С. В., Рябченко Л. Е., Сингирцев И. Н., Яненко А. С.
4. Pat. 5998180 US. Nitrilase from Rhodococcus rhodochrous
for converting acrylonitrile directly to acrylic acid / Armitage
Y. Ch., Hughes J., Webster N. A.
5. Nagasawa T., Nakamura T., Yamada H. ε-Caprolactam, a
new powerful inducer for the formation of Rhodococcus
rhodochrous J1 nitrilase // Arh. Microbiol. 1990. Vol. 155.
P. 13–17.
6. Nagasawa T., Nakamura T., Yamada H. Production of
acrylic and methacrylic acid using Rhodococcus rhodochrous
J1 nitrilase // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1990.
Vol. 34. P. 322–324.
7. Kobayashi M., Yanaka N., Nagasawa T., Yamada H.
Hyperinduction of an alifatic nitrilase by Rhodococcus
rhodochrous K 22 // FEMS Microbiol. Lett. 1991.
Vol. 77, № 1. P. 121–124.
8. Nagasawa T., Mauger J., Yamada H. A novel nitrilase,
arylacetonitrilase, of Alcaligenes faecalis JM3. Purifi cation
and characterization // Eur. J. Biochem. 1990. Vol. 194,
№ 3. P. 765–772.
9. Pat. 61-43037 JP. Способ получения акриловой (мет),
акриловой кислоты / Watanabe I.
10. Забазная Е. В., Козулин С. В., Воронин С. П. Отбор
штаммов, трансформирующих акрилонитрил и акри-
ламид в акриловую кислоту // Прикладная биохимия
и микробиология. 1998. Т. 34, № 4. С. 377–381.
11. Пат. 2081169 RU, С 1 МКИ6 С12 N 9/78, C12 P7/40,
13/02, C12 R 1:05. Штамм бактерий Alcaligenes species
– продуцент нитрилазы / Забазная Е. В., Козу-
лин С. В., Куликова Л. К., Воронин С. П.
12. Zheng Y.-G., Chen J., Liu Z.-Q. Isolation, identifi cation and
characterization of Bacillus subtilis ZJB-063, a versatile
nitrile-converting bacterium // Appl. Microbiol. Biotechnol.
2008. Vol. 77. P. 985–993.
13. Полтавская С. В. Биокаталитическое получение акри-
лата аммония : дис. … канд. биол. наук. Саратов, 2005.
135 с.
14. Милько Е. С., Котова И. Б., Нетрусов А. И. Процесс
диссоциации у бактерий : учеб. пособие. М.: МАКС
Пресс, 2007. 68 с.
15. Определитель бактерий Берджи : в 2 т. Т. 1 / пер.
с англ. ; под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита.
М. : Мир, 1997. 432 с.
16. Лурье Ю. Ю. Справочник по аналитической химии.
6-е изд. перераб. и доп. М. : Химия, 1989. 448 с.
17. Pat. 5135858 US, Int.Cl.5 C12 P13/04, C12 P17/00, C12
P13/00, C12 R1/01. Process for biological production of
organic acids / Yamada H., Nagasawa T., Nakamura T.
18. Пат. 2188864 RU, МПК7 С12 N9/78, C12 N1/20, С12
Р13/02, C12 R1:01) Нитрилаза, штамм Rhodococcus
rhodochrous – продуцент нитрилазы (варианты),
способ получения акрилата аммония, способ детеке-
тэйдж И. К. Хьюс Д., Вебстер Н. Э.
19. Pat. 6162624 US, Int.Cl C12 P007/40. Production of ammonium
acrylate /Symes K. Ch., Hughes J.
20. Pat. 6361981 US, Int.Cl6 C12 P007/62. Production of
ammonium acrylate /Symes K. Ch., Hughes J.
21. Пат. 2182928 RU, МПК7 С12 Р7/40, С12 R1:01. Способ
получения водного раствора (мет)акриловой кислоты
или ее соли / Саймс К. Ч., Хьюс Д.
22. Pat. 1-132392 JP, Int. Cl4 C12p 7/40, C12 R1:05.
Micro biological production of monocarbocxylic acid /
Kawakami K., Tanabe T., Inoue Sh.